（一） 目的

 建立高壓滅菌鍋操作以及維護保養(yǎng)的標準程序，規(guī)范操作人員的操作，從而確保人員的安全及設(shè)備的正常運行。

（二） 范圍

適用于本所高壓蒸汽滅菌器滅菌效果的驗證。

（三） 職責

3.1 質(zhì)量負責人批準該驗證程序。 

3.2 質(zhì)量監(jiān)督員負責監(jiān)督該程序的實施。

3.3 檢驗人員負責該程序的實施，并做好相關(guān)記錄。

（四） 程序

4.1 檢驗人員按該程序?qū)嵤?/span>驗證，做好記錄，做出結(jié)果評價，上報質(zhì)量負責人。

4.2 以上驗證結(jié)果經(jīng)質(zhì)量負責人批準，以后高壓蒸汽滅菌器按驗證的方法操作。

（五）試驗步驟

高壓蒸氣滅菌器使物品滅菌后達到無菌要求，這是藥品實驗中的基本保證。高壓滅菌器滅菌效果是否合格足實驗成敗的最基礎(chǔ)最關(guān)鍵的首要步驟。除少數(shù)培養(yǎng)基只需加熱溶解，不需高壓滅菌外，大部分培養(yǎng)基均需121℃高壓滅菌15-30分鐘。尤其是對無菌試驗培養(yǎng)基滅菌不徹底，直接關(guān)系到對藥品的無菌試驗結(jié)果。因此必須認真對高壓滅菌器進行滅菌效果的驗證。為此我們提供了進行滅菌效果驗證的一個簡易可行的方法。

嗜熱脂肪芽胞桿菌

(Bacillus stearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量5-105CFU/片。

5.1.2 121℃壓力蒸氣滅菌化學(xué)指示卡。

5.1.3 溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基116℃高壓滅菌20分鐘后備用。

5.1.4 0—150℃留點溫度計。

留點溫度計標化合格后方可用于驗證試驗。檢測前，需將溫度計的水銀柱甩至40℃以下。每次監(jiān)測后留點溫度計的溫差應(yīng)存1℃之間，則說明滅菌器內(nèi)的溫度分布是均勻的。

滅菌后的菌片應(yīng)在嚴格無菌操作條件下放入滅菌后的溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基內(nèi)56-60℃培養(yǎng)24-48小時，觀察顏色變化。如培養(yǎng)基變?yōu)辄S色，說明菌片中的嗜熱脂肪芽胞桿菌尚未完全滅活，細菌仍可在培養(yǎng)基中生長，分解葡萄糖產(chǎn)酸變?yōu)辄S色。如培養(yǎng)基顏色不變化仍為紫色，則說明芽胞已滅活。同時要用未經(jīng)滅菌的紙片放入培養(yǎng)基內(nèi)作為陽性對照，不加紙片的空白培養(yǎng)基作為陰性對照。

化學(xué)指示卡上的指示色塊，在高壓蒸氣滅菌時，由淡黃色變?yōu)楹谏�。隨著顏色變化的深淺，并與對照色相比，可判斷滅菌效果是否達到要求。化學(xué)指示卡應(yīng)在干燥處保存。遇潮會變色，影響滅菌效果的觀測。

高壓蒸氣滅菌必須使蒸氣順利進入滅菌器內(nèi)，與滅菌物品接觸，并將原有的冷空氣排出方可達到滅菌的效果。要進行空載熱分布和滿載熱穿透力驗證(滿載時不超過總體積的2/3)。二種驗證各重復(fù)三次，共做六次。

5個點六次試驗表明溫度均在121℃，化學(xué)指示卡變黑；程度與對照色一致；培養(yǎng)基均未改變顏色，說明高壓蒸氣滅菌效果合格。

5.3 驗證結(jié)果與評定

驗證結(jié)束后，驗證人員依據(jù)試驗結(jié)果對本次驗證做出評價和結(jié)論，并擬定高壓蒸汽滅菌器的操作規(guī)程和滅菌驗證頻次，上報質(zhì)量負責人。

5.4 質(zhì)量記錄

《高壓蒸汽滅菌效果驗證記錄》