材料與試劑
1.抗原 人工感染急性阿留申病貂組織提純抗原。
2.標準陽性血清和陰性血清,供試驗對照。
3.待測血清
4.瓊脂糖
5.0.05Mol/L pH8.6巴比妥緩沖液
6.玻璃板 10cm×4.5cm。
7.打孔器 孔徑3mm。
8.微量加樣器 100µl。
操作方法
1. 制瓊脂糖板 1%瓊脂糖,10ml鋪于10×4.5cm的玻板上,厚度約3mm。
2. 打孔 孔徑3mm,孔距8mm。
3. 加樣 待檢血清加入陽極孔,抗原加入陰極孔,每孔10ul。同時設標準陽性和標準陰性血清對照。
4. 電泳 抗原孔置陰極端。雙層濾紙搭橋,電壓90V~100V,電泳時間30min~60min。
結(jié)果測定
在對照組成立的情況下,在抗原和待測血清之間形成一條清晰灰白色沉淀線,稍偏向血清孔,為陽性。
注意事項
1. 抗原必須低溫(-25℃)保存。4℃保存一周。
2. 電泳必須用純度較高的瓊脂糖,緩沖液pH8.6,電壓不超過100V,否則影響檢查效果。