(二)免疫擴散(immunodiffusion)和免疫電泳(immunoelectrophoresis)

 

1．免疫擴散 于一定條件下，抗原與抗體在瓊脂凝膠中相遇，在二者含量比例合適時形成肉眼可見的白色沉淀。本法有兩種類型：①單相免疫擴散：將一定量的抗體混入瓊脂凝膠中，使抗原溶液在凝膠中擴散而形成沉淀環(huán)，其大小與抗原量成正比；②雙相免疫擴散：將抗原與抗體分別置于凝膠板的相對位置，二者可自由擴散并在中間形成沉淀線。用雙相免疫擴散法既可用已知抗原檢測未知抗體，也可用已知抗體檢測未知抗原。

 

2．免疫電泳 是將免疫擴散與蛋白質(zhì)凝膠電泳相結(jié)合的一項技術(shù)。事先將抗原在凝膠板中電泳，之后在凝膠槽中加入相應(yīng)抗體，抗原和抗體雙相擴散后，在比例合適的位置，產(chǎn)生肉眼可見的弧形沉淀線。

 

(三)間接紅細胞凝集試驗(indirect haemagglutination test，IHA) 以紅細胞作為可溶性抗原的載體并使之致敏。致敏的紅細胞與特異性抗體結(jié)合而產(chǎn)生凝集，抗原與抗體間的特異性反應(yīng)即由此而顯現(xiàn)。常用的紅細胞為綿羊或O型人紅細胞。

 

(四)間接熒光抗體試驗 (indirect fluorescent antibody method，IFA)

 

vvv 本法用熒光素(異硫氰基熒光素)標(biāo)記第二抗體，可以進行多種特異性抗原抗體反應(yīng)，即可檢測抗原又可檢測抗體。本法具有較高的敏感性、特異性和重現(xiàn)性等優(yōu)點，除可用于寄生蟲病的快速診斷，流行病學(xué)調(diào)查和疫情監(jiān)測外，還可用于組織切片中抗原定位以及在細胞和亞細胞水平觀察和鑒定抗原、抗體和免疫復(fù)合物。

 

(五)對流免疫電流試驗 (counter-immunoelectrophoresis，CIE) 對流免疫電泳試驗是以瓊脂或瓊脂糖凝膠為基質(zhì)的一種快速，敏感的電泳技術(shù)。既可用已知抗原檢測抗體，又可用已知抗體檢測抗原。反應(yīng)結(jié)果可信度高，適用范圍廣。以本法為基礎(chǔ)改進的技術(shù)有酶標(biāo)記抗原對流免疫電泳(enzyme-linked antigen counterimmunoelectrophoresis,ELACIE )和放射對流免疫電泳自顯影(radio-immuno-counterelectrophoretic autography，RCIEPA)等技術(shù)。二者克服了電泳技術(shù)本身不夠靈敏的弱點。

 

(六)酶聯(lián)免疫吸附試驗 (enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)

 

vvv 酶聯(lián)免疫吸附試驗原理是將抗原或抗體與底物(酶)結(jié)合，使其保持免疫反應(yīng)和酶的活性。把標(biāo)記的抗原或抗體與包被于固相載體上的配體結(jié)合，再使之與相應(yīng)的無色底物作用而顯示顏色，根據(jù)顯色深淺程度目測或用酶標(biāo)儀測定OD值判定結(jié)果。

 

(七)免疫酶染色試驗 (immunoenzyme staining test，IEST) 免疫酶染色試驗以含寄生蟲病原的組織切片、印片或培養(yǎng)物涂片為固相抗原，當(dāng)其與待測標(biāo)本中的特異性抗體結(jié)合后，可再與酶標(biāo)記的第二抗體反應(yīng)形成酶標(biāo)記免疫復(fù)合物，后者可與酶的相應(yīng)底物作用而出現(xiàn)肉眼或光鏡下可見的呈色反應(yīng)。

 

(八)免疫印跡試驗(immunobloting technique，ELIB) 免疫印跡試驗又稱免疫印漬或western blot，是由十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酸胺凝膠電泳(SDS-PAGE)，電轉(zhuǎn)印及固相酶免疫試驗三項技術(shù)結(jié)合為一體的一種特殊的分析檢測技術(shù)。本法具有高度敏感性和特異性。