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氯霉素檢測盒說明書

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2011-03-14  來源:北京華安麥科生物技術(shù)有限公司
核心提示:氯霉素檢測盒說明書


氯霉素檢測試劑盒可定性、定量檢測動物組織(含水產(chǎn))、牛奶、蜂蜜、飼料、雞蛋等樣品中氯霉素的殘留

一、概要
 氯霉素 (Chloramphenicol,CAP)曾是應(yīng)用廣泛的抗菌素,但由于其存在嚴重的副作用,能引起人的再生障礙性貧血,粒細胞缺乏癥等疾病,歐美等發(fā)達國家已相繼禁止或嚴格禁止使用。
 氯霉素檢測試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)的新一代藥物殘留檢測產(chǎn)品,操作時間僅需45min,能最大限度地減少操作誤差和工作強度。

二、試驗原理
 氯霉素檢測試劑盒采用直接競爭ELISA方法,在酶標板微孔條上預(yù)包被氯霉素抗體,樣品中殘留的氯霉素和酶標氯霉素抗原競爭微孔條上預(yù)包被的抗體,經(jīng)TMB底物顯色,樣品吸光值與其殘留物氯霉素的含量成負相關(guān),與標準曲線比較再乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣品中氯霉素的含量。

三、交叉反應(yīng)率
氯霉素………………………………………………………100%
氯霉素堿……………………………………………………0.5%
甲基氯霉素……………………………………………≤0.05%
氟苯尼考…………………………………………………<0.01%
氟苯尼考胺………………………………………………<0.1%
*注:標準品濃度為0ppb,0.05ppb,0.15ppb,0.45ppb,1.35ppb,4.05ppb

四、操作步驟:
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20~25℃)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔放入自封袋,保存于2~8℃。
3、洗滌工作液在使用前也需回溫。
4、編號:將樣品/標準品對應(yīng)微孔按序編號,并記錄標準孔和樣品孔所在的位置。
5、加標準品/樣品:加標準品/樣品70l到對應(yīng)的微孔中,再加入氯霉素酶標物30l/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應(yīng)30min。
6、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌工作液300l/孔,充分洗滌5次,每次間隔30s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。
7、顯色:加入底物液A液50l/孔,再加底物液B液50l/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應(yīng)15~20min。
8、測定:加入終止液50l/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標儀于450nm處(建議用雙波長450/630nm檢測,請在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測定每孔OD值。(若無酶標儀,則不加終止液用目測法可進行判定)。

五、檢測方法靈敏度、準確度、精密度
試劑盒靈敏度:0.05ppb
樣品最低檢測限:
組織樣品……………………………………………0.1ppb
牛奶………………………………………………0.05ppb
飼料……………………………………………0.2ppb
蛋…………………………………………………………0.05ppb
蜂蜜…………………………………………………0.05ppb
回收率:
組織樣品……………………………………………… 102±15%
牛奶………………………………………………… 110±10%
飼料………………………………………………………93±10%
蛋………………………………………………………95±15%
蜂蜜………………………………………………………80±10%
精密度:試劑盒的變異系數(shù)均小于10%

六、注意事項
1、室溫低于20℃或試劑及樣品沒有回到室溫(20~25℃)會導(dǎo)致所有標準的OD值偏低。
2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標準曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。
3、每加一種試劑前需將其搖勻。
4、反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。
5、不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6、儲存條件:保存試劑盒于2~8℃,不要冷凍,將不用的酶標板微孔板放進自封袋重新密封。標準物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
7、試劑變質(zhì)的跡象
發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標準的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質(zhì)。
8、在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色時間為15~20min即可。若顏色較淺,可延長反應(yīng)時間到30min(或更長),但不得超過40min。反之,則減短反應(yīng)時間。
9、該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為25℃,溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

七、貯藏條件及保存期
貯藏條件:保存試劑盒于2~8℃。
保存期:該產(chǎn)品有效期為12個月。

 

編輯:songjiajie2010

 
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