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免疫膠體金技術(shù)的基本原理

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-06-27
氯金酸(HAuCl4)在還原劑作用下,可聚合成一定大小的金顆粒,形成帶負(fù)電的疏水膠溶液。由于靜電作用而成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài),故稱膠體金。膠體金顆粒由一個(gè)基礎(chǔ)金核(原子金Au)及包圍在外的雙離子層構(gòu)成,緊連在金核表面的是內(nèi)層負(fù)離子(AuC12-),外層離子層H 則分散在膠體間溶液中,以維持膠體金游離于溶膠間的懸液狀態(tài)。
膠體金顆粒的基礎(chǔ)金核并非是理想的圓球核,較小的膠體金顆;臼菆A球形的,較大的膠體金顆粒(一般指大于30nm以上的)多呈橢圓形。在電子顯微鏡下可觀察膠體金的顆粒形態(tài)。膠體金標(biāo)記,實(shí)質(zhì)上是蛋白質(zhì)等高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過(guò)程。吸附機(jī)理可能是膠體金顆粒表面負(fù)電荷,與蛋白質(zhì)的正電荷基團(tuán)因靜電吸附而形成牢固結(jié)合。用還原法可以方便地從氯金酸制備各種不同粒徑、也就是不同顏色的膠體金顆粒。這種球形的粒子對(duì)蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的吸附功能,可以與葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽綴合物等非共價(jià)結(jié)合,因而在基礎(chǔ)研究和臨床實(shí)驗(yàn)中成為非常有用的工具。
免疫金標(biāo)記技術(shù)(Immunogold labelling techique) 主要利用了金顆粒具有高電子密度的特性,在金標(biāo)蛋白結(jié)合處,在顯微鏡下可見(jiàn)黑褐色顆粒,當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時(shí),肉眼可見(jiàn)紅色或粉紅色斑點(diǎn),因而用于定性或半定量的快速免疫檢測(cè)方法中,這一反應(yīng)也可以通過(guò)銀顆粒的沉積被放大,稱之為免疫金銀染色。
 
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