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禽腺病毒在我國的流行情況調(diào)查

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2015-11-01  來源:信得科技
核心提示:針對目前國內(nèi)持續(xù)升溫的禽腺病毒感染,本文總結(jié)了信得科技從2013年至今對禽腺病毒的研究概況,文中分別從臨床癥狀、病理剖檢、血
 

針對目前國內(nèi)持續(xù)升溫的禽腺病毒感染,本文總結(jié)了信得科技從2013年至今對禽腺病毒的研究概況,文中分別從臨床癥狀、病理剖檢、血清學和分子流行病學調(diào)查等方法,闡述了當前我國家禽普遍存在的腺病毒感染,一是禽腺病毒不同血清型在我國不同省份的分布情況;二是分離的禽腺病毒的分群、血清型和基因型情況;三是各血清型禽腺病毒對家禽的危害情況。

腺病毒科是一類中等大小無囊膜的線狀單分子雙股DNA病毒,第一株禽腺病毒是從牛結(jié)節(jié)性皮炎的病料中分離到。1949Vanden Ende分離到一株禽腺病毒,以后又從雞胚中無意分離到了多株雞胚致死性孤兒病毒(CELO)。

1、腺病毒的分類

腺病毒科根據(jù)形態(tài)結(jié)構(gòu)、免疫學特性和宿主范圍可劃分為兩個屬:哺乳動物腺病毒屬和禽腺病毒屬。禽腺病毒根據(jù)其抗原結(jié)構(gòu)不同分為3個群。Ⅰ群主要是傳統(tǒng)的禽腺病毒,代表株是雞胚致死性孤兒病毒(CELO),它們共享有一種共同的群特異性抗原,其中從雞分離到的12個血清型(FAV1-12),火雞兩個血清型(FAV1-2),鵝三個血清型(GAV1-3)和鴨2個血清型。Ⅱ群禽腺病毒包括火雞出血性腸炎病毒(HEV)、大理石脾病毒和雞大脾病毒,它們與Ⅰ群禽腺病毒無抗原相關(guān)性。Ⅲ群禽腺病毒目前只有一個成員,即降蛋綜合征病毒(EDSV),它們只是部分的含有Ⅰ群禽腺病毒的共同抗原。腺病毒的分類是根據(jù)血清型或基因型來劃分的。病毒的血清性根據(jù)中核試驗來確定,Zsak等利用L1-L4四個高變環(huán)的特點和RFLP技術(shù)把Ⅰ群禽腺病毒劃分為A-E五個基因型。并且指出了致病性毒株之間在基因型上存在著某種基因的相關(guān)性。

2、禽腺病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)和理化特性

    禽腺病毒沒有囊膜,由12個五鄰體構(gòu)成二十面體頂角殼粒,五鄰體由2條纖突組成。此外,二十面體的非頂角殼粒稱為六鄰體(Hexon),該六鄰體蛋白對禽腺病毒分型至關(guān)重要,是抗原結(jié)合位點成分。

    禽腺病毒中Ⅰ群CELO病毒能夠凝集大鼠紅細胞,而不能凝集禽類的紅細胞,部分毒株可凝集綿羊紅細胞;Ⅱ群禽腺病毒無血凝性報道;Ⅲ群禽腺病毒EDSV可以凝集雞、鴨、鵝、火雞、鴿等禽類的紅細胞。由于沒有囊膜,所以禽腺病毒對外界環(huán)境抵抗力比較強,對乙醚、氯仿、胰蛋白酶、酚和乙酸均有抵抗力,可耐受PH3-9,在1:1000濃度甲醛中可被滅活,本病毒對碘制劑、次氯酸鈉和戊二醛敏感。歐福迪泡沫消毒劑由于含有戊二醛有效成分,可有效殺滅病原。

3、禽腺病毒的流行病學與致病性

    腺病毒大部分為長期潛伏病毒,引起無癥狀的感染,其中部分可以引起致病。Ⅰ群禽腺病毒存在于多種禽類的呼吸道和消化道,作為原發(fā)病原引起發(fā)病,往往與其他病毒CAV、IBDV等混合感染致病。引起雞包涵體肝炎的腺病毒病原已經(jīng)確定,多為Ⅰ群禽腺病的幾個血清型混合感染所致。

    病毒主要存在于雞的眼、上呼吸道以及消化道,但大多呈隱性感染不發(fā)病。病毒主要在消化道和上呼吸道內(nèi)復制,糞便、腸道、病變肝臟、腎臟和咽等均含有病毒。病毒主要通過雞胚垂直傳播,從感染雞群的雞胚或雛雞所制備的細胞分離物中可使病毒暴露出來。病毒通常在3周齡以上排出,在肉雞,排出病毒的高峰是4-6周;產(chǎn)蛋雞在5-9周,到14周齡后仍有70%可排毒。在同一農(nóng)場中可同時存在幾個不同的血清型。病毒可經(jīng)糞便、氣管和鼻腔粘膜水平傳播,病雞常無明顯癥狀,僅見萎頓、蹲伏、羽毛蓬松、肉髯和面部皮膚蒼白,生長不良。剖檢為肝炎,肝色淡質(zhì)脆、腫大,肝和骨骼肌有出血點,在肝細胞中有大而圓或不規(guī)則的嗜堿性或嗜酸性核內(nèi)包涵體。

從送檢來看,全國相當一部分地區(qū)出現(xiàn)了疑似病例,問題比較突出,最先在東部沿海省份,山東、江蘇、遼寧省份的白羽肉雞上和種雞上檢測到病原。后來陸續(xù)在內(nèi)陸省份,河南、安徽、河北和山西分離到病原。白羽肉雞、蛋雞、種雞、麻雞上都有發(fā)生,死亡情況因地區(qū)、品種而異。

    臨床上,病雞突然性的精神沉郁,羽毛蓬松,腹瀉,貧血,消瘦,最后死亡。剖檢發(fā)現(xiàn)肝臟腫大、質(zhì)脆、易碎,肝周炎,心包積液,膠凍樣,脾臟有白色壞死點,氣管有出血和粘液、肺臟淤血嚴重,個別病例腺胃有出血點,法氏囊全部有乳白色干酪樣物,腎臟呈現(xiàn)樹枝狀充血。

4、分子生物學診斷

    將送檢病料進行雞胚接種,提取DNA,利用腺病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ群分群引物和Ⅰ群腺病毒分型引物(FAV1-12)進行RT-PCR擴增,如圖所示:均能得到禽腺病毒目的條帶。

將條帶基因進行膠回收,測序,進化分析如下:

從分群角度對分離株進行規(guī)整可以看到新分離的禽腺病毒毒株都屬于Ⅰ群禽腺病毒,但是它們的血清型和基因型并不相同,通過對分離株基因型和血清型分析如下:

對Ⅰ群的禽腺病毒進行血清型和基因型分析,發(fā)現(xiàn)我國主要流行A、BC三種基因型,共6個血清型(火雞1型、1型、4型、5型、8a/b型),但是近期在豫南、皖北、蘇北、魯西北和膠東地區(qū)流行的禽腺病毒主要是血清4型和8a/b型,造成雞群的死亡率較高,發(fā)病急,有蔓延的趨勢。目前,信得科技禽病檢測中心已經(jīng)對周邊區(qū)域進行了取樣篩查,以便掌控最新的流行動態(tài)。

由于Ⅰ群禽腺病毒的12個血清型交叉保護性較差,所以在防控上必須選用與流行株匹配的疫苗株才能有效遏制疫情的蔓延。但是,目前市場上沒有商品化的疫苗,一些廠家和個體養(yǎng)戶生產(chǎn)的自家苗存在嚴重的散度風險,通過我們對市場病料的檢測,發(fā)現(xiàn)幾乎90%的雞群存在腺病毒、法氏囊、白血病、網(wǎng)內(nèi)兩兩,三三混合感染,所以自家苗在使用的同時也起著傳播病原的作用,當時雖然控制住了病情的發(fā)展,但隨之而來的是免疫抑制病的出現(xiàn),后期一些列的問題也會隨之而來。所以我們不建議使用腺病毒疫苗進行該病的防控,最好使用正規(guī)生產(chǎn)的精制卵黃抗體,它不散毒,起效快,方便使用,是控制腺病毒的首選。

注:H9代表禽流感H9亞型,ND代表雞新城疫,IB代表雞傳染性支氣管炎,IBD代表雞法氏囊,ALV代表雞白血病,CAV代表雞傳染性貧血,REV代表雞網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖癥,FAV代表雞腺病毒。

在禽腺病毒的防控上,我們提幾點建議:

疫苗預防:必須選用正規(guī)廠家生產(chǎn)的禽腺病毒疫苗,必須包括當前我國流行的禽腺病毒主要的4種血清型,另外,必須沒有禽白血病病毒、雞傳染性貧血病毒、網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖征病毒和法氏囊病毒等外源病毒污染。

卵黃抗體:就目前來說,精制卵黃抗體是治療禽腺病毒感染的最有效方案,粗制抗體由于雜質(zhì)較多,容易造成機體過大的應激反應。

    在以上兩種方案應用的同時,配合抗病毒藥物干擾素對腺病毒效果較好,期間用信必妥增強機體免疫力。由于腺病毒對福爾馬林和戊二醛等消毒劑敏感,對于禽舍,應該做好環(huán)境衛(wèi)生消毒工作,防止病毒的擴散和傳播。
編輯:foodnews

 
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