感官檢驗作業(yè)指導書

各種產(chǎn)品的感官檢驗基本包含組織狀態(tài)、色澤、氣味、滋味是否正常，有無異物，液體樣品有無分層及渾濁現(xiàn)象，粉狀樣品有無水濕、結塊，有無霉變、腐敗變質(zhì)等現(xiàn)象。

在感官檢驗時同時要檢驗產(chǎn)品的生產(chǎn)日期、保質(zhì)期、凈含量等。

 

理化檢驗作業(yè)指導書

（一）化學試劑

化學試劑根據(jù)用途分為：一般試劑、基礎試劑、高純試劑、色譜試劑、生化試劑、光譜純試劑和指示劑等。一般用于食品檢驗的有一般試劑、基礎試劑、高純試劑和專用試劑。

基礎試劑：可用作基準物質(zhì)的試劑叫做基準試劑，也可稱為標準試劑�；�礎準試劑可用來直接配制標準溶液，用來校正或標定其他化學試劑。如在配置標準溶液時用于標定標準溶液用的基準物。

化學試劑的儲存：

（1）化學試劑大多數(shù)都具有毒性及危害性，要加強管理。

（2）隔離存放：易燃類、劇毒類、強腐蝕性類、低溫貯存的等分類放置；要求化驗人員有一定的相關知識。

（3）一般存放于通風、陰涼、溫度低于30℃的藥品柜中。

有些藥品遇光容易分解，避光保存。固體、液體、酸、堿分別放置。

 

（二）儀器和器皿

（1）檢驗所用的儀器應處于正常狀態(tài)，要符合精度要求；同時高級的精密儀器要由經(jīng)過專業(yè)培訓的人員或?qū)�業(yè)技術人員操作，不可在未弄清使用方法前動用儀器。

（2）儀器因經(jīng)常使用，檢測性能會逐漸降低，所以測試儀器要定期檢定和校準。

（3）一般的玻璃器皿采用一次計量�？梢允撬偷椒ǘǖ挠嬃繂挝贿M行計量，也可以送一套到法定的計量單位進行計量，然后用這套計量好的容器對本企業(yè)生產(chǎn)中使用的容器進行自校準。玻璃儀器的計量一定要結合本企業(yè)的實際情況合理進行校正，并不是所有的儀器都要送檢，但作為判定數(shù)據(jù)使用的器皿一定要計量。

 

（三）溶液的配制

1.標準溶液的配制

配制標準溶液用水，應符合GB/T 6682－2008的要求。

所用試劑純度應在分析純以上。標定所用的基準試劑應為容量分析工作中使用的基準試劑。

所用分析天平及砝碼應定期檢定。

所用滴定管、容量瓶及移液管均需定期校正。

制備標準溶液的溫度系指20℃時的濃度。

標定標準溶液時，平行試驗不得少于8次，兩人各作4次平行測定，檢測結果按規(guī)定的方法進行數(shù)據(jù)的取舍后取平均值，濃度值取4位有效數(shù)字。

凡規(guī)定用“標定”和“比較”兩種方法測定濃度時，不得略去其中任何一種。濃度值以標定結果為準。

配制濃度等于或低于0.02 mol/L的標準溶液時，應于臨用前將濃度高的標準溶液用煮沸并冷卻了純水稀釋，必要時重新標定。

碘量法反應時，溶液溫度不能過高，一般在15-20℃之間進行。

滴定分析用標準溶液在常溫(15-25℃)下，保存時間一般不得超過2個月。

標準溶液配制的分類：

有直接配制法和標定法兩種。

（1）直接配制法

在分析天平上準確稱以一定量的已干燥的基準物(基準試劑)溶于純水后，轉(zhuǎn)入已校正的容量瓶中，用純水稀釋至刻度，搖勻即可。

（2）標定法

很多試劑并不符合基準物的條件，例如市售的濃鹽酸中HCL很易揮發(fā)，固體氫氧化鈉很易吸收空氣中的水分二氧化碳，高錳酸鉀不易提純而易分解等。因此它們都不能直接配制標準溶液。一般暗先將這些物質(zhì)配成近似所需濃度的溶液，再用基準物測定其準確濃度。這一操作稱為標定。

配制溶液注意事項

配制溶液的蒸餾水一定要達到規(guī)定標準，防止水中雜質(zhì)影響實驗結果。

稱量要準

特別是在配制標準溶液時，稱取標準物質(zhì)的量要準確到小數(shù)點后第四位，稱取的試劑要毫無損失地轉(zhuǎn)移到容量瓶內(nèi)，定容要準確。作為檢驗人員要學會看懂標準要求，如標準上寫著“準確稱取”或“精確到0.0001g、0.001g”的要求，就要準確稱取到相應的精度要求；同時在稱取過程中盡量減少中間變更的容器。

配制標準溶液時，需要干燥的試劑或基準物（根據(jù)標準中的具體要求）一定要進行烘干后方可使用，而且要在烘干后盡快使用。

每瓶試劑溶液必須有標明名稱、濃度和配制日期的標簽，標準溶液的標簽還應標明標定日期、標定者。

溶液要用帶塞的試劑瓶盛裝。見光易分解的溶液要裝于棕色瓶中，揮發(fā)性試劑、見空氣易變質(zhì)及放出腐蝕性氣體的溶液，瓶塞要嚴密。濃堿液應用塑料瓶裝，如裝在玻璃瓶中，要用橡皮塞緊，不能用玻璃磨口塞。

配制硫酸、磷酸、硝酸等溶液時，都應把酸倒入水中，對于溶解時放熱較多的試劑，不可在試劑瓶中配制，以免炸裂。

不能用手接觸腐蝕性及有劇毒的溶液。劇毒溶液應先作解毒處理，不可直接倒入下水道。

 

（四）樣品的理化檢驗

微生物作業(yè)指導書

（一）樣品的采集

1.采樣目的

確保采集的樣品能代表全部被檢驗的物質(zhì)，使檢驗分析更具代表性。

2.采樣原則

采集的樣品要有代表性，采樣時應首先對該批食品原料、加工、運輸、貯藏方法條件、周圍環(huán)境衛(wèi)生狀況等進行詳細調(diào)查，檢查是否有污染源存在，同時能反映全部被檢食品的組成、質(zhì)量和衛(wèi)生狀況。

應設法保持樣品原有微生物狀況，在進行檢驗前不得污染，不發(fā)生變化。

采樣必須遵循無菌操作程，容器必須滅菌，避免環(huán)境中微生物污染，容器不得使用煤酚皂溶液，新潔爾滅、酒精等消毒物滅菌，更不能含有此類消毒藥物，以避免殺掉樣品中的微生物，所用剪、刀、匙用具也需滅菌方可使用。

3.采樣數(shù)量

取樣數(shù)量的確定，應考慮分析項目的要求、分析方法的要求及被檢物的均勻程度三個因素。樣品應一式兩份，分別供檢驗、復檢使用，每份樣品數(shù)量一般不少于200g。

根據(jù)不同種類采樣數(shù)量略有不同，實驗室檢驗樣品一般為25克。

4.采樣方法

采取隨機抽樣的方式。

直接食用的小包裝食品，盡可能取原包裝，直到檢驗前不要開封，以防污染。

如為非冷藏易腐食品，應迅速將所采樣品冷卻至0－4℃。

不要使樣品過度潮濕，以防食品中固有的細菌增殖。

在將冷凍食品送到實驗室前，要始終保持樣品處于冷凍狀態(tài)。樣品一旦融化，不可使其再凍，保持冷卻即可。

5.樣品的保存和運送

樣品采集完后，應迅速送往實驗室檢驗，送檢過程中一般不超過3h，如路程較遠，可保存在1－5℃環(huán)境中，如需冷凍者，則在冷凍狀態(tài)下送檢。

冷凍樣品應存放在－15℃以下冰箱內(nèi)；冷卻和易腐食品應存放在0－5℃冰箱或冷卻庫內(nèi)；其它食品可放在常溫冷暗處。

運送冷凍和易腐食品應在包裝容器內(nèi)加適量的冷卻劑或冷凍劑。保證途中樣品不升溫或不融化。

待檢樣品存放時間一般不應超過36小時。

（二）檢驗樣品的制備

樣品的全部制備過程均應遵循無菌操作程序。

檢驗冷凍樣品前應先使其融化。可在0－4℃融化，時間不超過18小時，也可在溫度不超過45℃的環(huán)境中融化，時間不超過15分鐘。

檢驗液體或半固體樣品前應先將其充分搖勻。如容器已裝滿，可迅速翻轉(zhuǎn)25次；如未裝滿，可于7s內(nèi)以30cm的幅度搖動25次。從混樣到檢驗間隔時間不應超過3分鐘。

開啟樣品包裝前，先將表面擦干凈，然后用75％乙醇消毒開啟部位及其周圍。

非粘性液體樣品可用吸管吸取一定量，然后加入適量的稀釋液或培養(yǎng)基內(nèi)，吸管插入樣品內(nèi)的深度不應超過2.5cm，也不得將吸有樣品的吸管浸入稀釋液或培養(yǎng)基內(nèi)。

粘性液體樣品可用滅菌容器稱取一定量，然后加入適量的稀釋液或培養(yǎng)基。

固體或半固體樣品可用滅菌的均質(zhì)杯稱取一定量，再加適量的稀釋液或培養(yǎng)基進行均質(zhì)，從樣品的均質(zhì)到稀釋和接種，相隔時間不應超過15分鐘，或是在無菌生理鹽水里放入玻璃珠，充分振蕩搖勻。

（三）檢驗

實驗室收到樣品后或是自己取樣后，首先進行外觀檢驗，及時按照國家標準檢驗方法進行檢驗，檢驗過程中要認真、負責，嚴格進行無菌操作，避免環(huán)境中微生物污染。

檢驗所使用的稀釋液、試劑、培養(yǎng)基接觸的一切器皿必須經(jīng)過有效的滅菌。

實驗室所用儀器、設備的性能應定期檢查和校正。

制備試劑和培養(yǎng)基所用的水，應為無離子水或用玻璃器皿蒸餾的蒸餾水。

檢驗結束后，所有帶菌的培養(yǎng)基、試劑、稀釋液和器皿必須盡快滅菌和洗刷。清洗過的器皿不應殘留洗滌劑的痕跡。

（四）檢驗記錄和結果的報告

經(jīng)檢驗的每份樣品都應有完整的檢驗記錄。樣品檢驗過程中所用方法、出現(xiàn)的現(xiàn)象和結果等均要用文字寫出試驗記錄，以作為對結果分析、判定的依據(jù)，記錄要求詳細、清楚、真實、客觀、不得涂改和偽造。

檢驗結束后，根據(jù)檢驗結果，及時填寫檢驗報告書，簽字并經(jīng)負責人審核簽字后發(fā)出。

（五）樣品的微生物檢驗流程

 

（六）微生物操作注意要點

無菌操作要求

（1）微生物實驗室工作人員，必須有嚴格的無菌觀念，許多實驗要求在無菌的條件下進行，主要原因，一是防止試驗操作中人為污染樣品，二是保證工作人員安全，防止檢出的致病菌由于操作不當造成個人污染；

（2）接種細菌時必須穿工作服、帶工作帽；

（3）進行接種食品樣品時，必須穿專用的工作服、帽及拖鞋，應放在無菌室緩沖間，工作前經(jīng)紫外線消毒后使用；

（4）接種食品樣品時，應在進無菌室前用肥皂洗手，然后用酒精棉球?qū)⑹植粮蓛簦?/span>

（5）進行接種所用的吸管、平皿及培養(yǎng)基等必須經(jīng)消毒滅菌，打開包裝未使用完的器皿，不能放置后再使用，金屬用具應高壓滅菌或用酒精點燃燒灼三次后使用；

（6）從包裝中取出吸管時，吸管尖部不能觸及試管或平皿邊；

（7）接種樣品、轉(zhuǎn)種細菌必須在酒精燈前操作，接種細菌活樣品時，吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒；

（8）接種環(huán)和針在接種細菌前應經(jīng)火焰燒灼全部金屬絲，必要時還要燒到針和環(huán)與桿的連接處；

（9）吸管吸取菌液或樣品時，應用相應的吸爾球吸取，不得直接用口吸。

 

無菌間使用要求

（1）無菌間應密封，不得隨意打開，并設有與無菌間大小相應的緩沖間及門，另盡量設有小窗，以備進入無菌間后傳遞物品；

（2）無菌間應保持清潔，工作后用巴氏消毒溶液消毒，擦拭工作臺面，不得存放與試驗無關的物品；

（3）無菌間使用前后應將門關緊，打開紫外燈消毒（30W，1m）時，照射時間不少于30分鐘，使用紫外燈，應注意不得直接在紫外線下操作，以免引起損傷，燈管每隔兩周需用酒精球輕輕擦拭，除去上面的灰塵和油垢，以減少紫外線穿透的影響；

（4）處理和接種食品樣品時，進入無菌間操作，不得隨意出入，如需要傳遞物品，可通過小窗傳遞。

消毒滅菌要求

微生物檢測用的玻璃器皿、金屬用具及培養(yǎng)基、被污染和接種的培養(yǎng)物等，必須經(jīng)滅菌后方能使用。

（1）滅菌前準備

①所有需經(jīng)滅菌的物品首先要清洗晾干，玻璃器皿如吸管、平皿用紙包裝嚴密，如用金屬筒應將上面氣孔打開。

裝培養(yǎng)基的三角瓶塞好棉塞，試管蓋好蓋，用紙包好。

（2）裝放

將物品分別包扎好，直接放入消毒筒內(nèi)，物品之間不能過擠。

（3）設備檢查

①檢查門的開關是否靈活，橡皮圈有無損壞，是否平整。

②壓力表蒸氣排盡時是否停留在零位，蓋好蓋，通蒸氣或加熱后，觀察是否漏氣，壓力表與溫度計所標示的狀況是否吻合，管道有無堵塞。

③對有自動電子程序控制裝置的滅菌器，使用前應檢查規(guī)定的程序，是否符合于進行滅菌處理的要求。

（4）滅菌處理

手提式高壓鍋或立式壓力蒸氣滅菌器的使用應按下列步驟進行：

①高壓鍋內(nèi)加入清水（重復使用時應將水量補足，水變混濁需要更換）。

②將要滅菌的物品放入滅菌鍋內(nèi)，蓋好蓋子。

接通電源，加熱，水沸騰后打開放氣閥排氣，直到壓力表指針降到0.05Mpa時，關掉放氣閥。

指針指到121℃時開始計時，達到要求的滅菌時間關掉開關，冷卻直到壓力降到0.05Mpa即可通過放氣閥緩慢放氣。

（5）滅菌溫度與時間

①不同類型培養(yǎng)基的滅菌溫度與時間的不同。

②滅菌處理：滅菌后物品，按正常情況已屬無菌，從滅菌器中取出應仔細檢查，以免再度污染。

物品取出，隨即檢查包裝的完整性，若有破壞或棉塞脫掉，不可作為無菌物品使用。

取出的物品，如外包裝有明顯的水浸者，不可作為無菌物品使用。

培養(yǎng)基或試劑等，應檢查是否符合達到滅菌后的色澤或狀態(tài)，未達到者應廢棄。

取出的物品掉落在地或誤放不潔之處，或沾有水液，均視為受到污染，不可作為無菌物品使用。

取出的合格滅菌物品，應存放于貯藏室或防塵柜內(nèi)，嚴禁與未滅菌物品混放。

凡屬合格物品，應標有滅菌日期及有效期限。

每批滅菌處理完成后，記錄滅菌品名、數(shù)量、溫度、時間、操作者。

 

（6）有毒有菌污物處理要求

微生物實驗室所用實驗器材、培養(yǎng)物等未經(jīng)消毒處理，一律不得帶出實驗室。

經(jīng)培養(yǎng)的污染材料及廢棄物應放在嚴密的容器或鐵絲筐內(nèi)，并集中存放在指定地點，待統(tǒng)一進行高壓滅菌。

經(jīng)微生物污染的培養(yǎng)物，必須經(jīng)121℃，30min高壓滅菌。

染菌后的吸管，使用后放入5%煤酚皂溶液或石炭酸溶液中，最少浸泡24小時，再經(jīng)121℃，30min高壓滅菌。

涂片染色沖洗片的液體，一般可直接沖入下水道，染色的玻片放入5%煤酚皂液中浸泡24h后，煮沸洗滌。

打碎的培養(yǎng)物，立即用5%煤酚皂液或石炭酸噴灑和浸泡被污染部位，浸泡半小時后再擦拭干凈。

 

（7）玻璃器皿的清洗要求

①目的  

為了保證微生物實驗順利進行，保證實驗結果的準確性，不影響實驗進度，必須把器皿徹底清洗干凈。

②注意事項

任何洗滌方法，都不應對玻璃器皿有所損傷，不能用有腐蝕作用的化學藥劑，也不能使用比玻璃器皿硬度大的物品來擦拭玻璃器皿。

一般新的玻璃器皿用2%的鹽酸液浸泡數(shù)小時，后用水沖洗干凈。

用過的器皿應立即洗滌，放置太久會增加洗滌困難。

強酸、強堿及其它氧化物和有揮發(fā)性的有毒物品，都不能倒在洗滌槽內(nèi)，以免污染環(huán)境水質(zhì)，必須倒在廢水缸中。

含有對人體有傳染性病菌的器具，應先煮沸滅菌后再進行洗滌。

難洗滌的器皿不要與易洗滌的器皿放在一起，以免增加洗滌的麻煩。有油的器皿不要與無油的器皿混在一起，否則使本來無油的器皿沾上了油垢，浪費藥劑和時間。

洗滌劑的種類：水、洗衣粉、檸檬洗滌劑、肥皂。

 ③洗滌方法

含有瓊脂培養(yǎng)基的玻璃器皿的洗滌方法：事先應將器皿中的瓊脂刮去，然后用清水洗滌，并用試管刷刷其瓶壁，以除去粘污在壁上的灰塵和油垢。用洗衣粉水洗去油污，然后用自來水（蒸餾水）沖洗。洗好后的器皿應倒置晾干或置于干燥箱中干燥至無水滴。

載玻片及蓋玻片的洗滌法：新載玻片及蓋玻片先在20%的鹽酸溶液中浸一小時，然后用自來水沖洗2~3次，最后用蒸餾水換洗2~3次。用過的載玻片及蓋玻片，應用紙擦去油垢，再放在5%的洗衣粉水中煮30分鐘后立即用自來水沖洗，然后放在稀的洗液中浸泡2小時，再用蒸餾水沖洗至中性。

移液管、倒管的洗滌方法：新的移液管及倒管先在的５％鹽酸溶液中浸一小時，然后用自來水沖洗幾次，最后用蒸餾水換洗幾次。用過的移液管、倒管先用自來水洗去表面的殘液，再放在洗衣粉水中浸泡一小時以上，再用自來水沖洗至管內(nèi)壁無殘渣，最后用蒸餾水換洗次，晾干后入恒溫干燥箱中烘干。

 

（8）培養(yǎng)基、無菌水的制備

①基本原理

培養(yǎng)基的種類很多，不同微生物所需要的培養(yǎng)基不同。培養(yǎng)基制成后的物理狀態(tài)可分為液體、固體、半固體三種類型，我們實驗室常用的是固體培養(yǎng)基。

②器材

三角瓶、試管、燒杯、玻棒、天平、搪瓷杯、量筒、鋁箔紙、藥勺、杜氏小管、硅膠塞（棉塞）、電爐。

培養(yǎng)基的種類

營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基、乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基、伊紅美蘭瓊脂培養(yǎng)基等。

方法步驟

培養(yǎng)基的制備：

稱量：根據(jù)培養(yǎng)基的配方，稱取適量藥品于搪瓷杯中。

溶解：用量筒量取所需水量，置電爐上加熱，一邊攪拌，至完全溶解，加熱至沸騰，拔掉電源，待冷卻。

分裝：根據(jù)不同需要，立即趁熱分裝入三角瓶或試管中，分裝三角瓶以不超過三角瓶一半為宜，分裝試管一般為管長的1/5（需根據(jù)試管的大小而定）。液體培養(yǎng)基如乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基約分裝10毫升左右。

塞橡膠（棉）塞：裝好培養(yǎng)基的試管應塞上橡膠（棉）塞，松緊合適，緊貼管壁，不留縫隙，約1/2塞入內(nèi)，這樣即可過濾空氣，避免雜菌侵入，又可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā)。

包裝：三角瓶棉塞頭部應用錫箔紙包扎，試管集中于試管簍。

無菌水的制備：

用10mL移液管量取9.0mL蒸餾水（稀釋水）裝入試管中。

用250mL量筒量取225mL蒸餾水（稀釋水）裝入250mL的三角瓶中，可置少許玻璃珠于三角瓶內(nèi)，塞上橡膠（棉）塞用牛皮紙包扎好，高壓滅菌備用。

 

（9）設備使用原則

①實驗設備的使用由實驗員嚴格按照操作說明書進行，其他人員不得隨意操作。

②實驗設備的日常維護保養(yǎng)由實驗員根據(jù)設備操作說明書進行，出現(xiàn)不可排除的故障時，經(jīng)部門總經(jīng)理批準，商請專業(yè)人員維修。

③實驗設備應定期進行計量檢測，確保儀器的準確性。

④實驗員應愛護儀器設備，使用前應檢查，使用后應及時清理清潔，并定期維護保養(yǎng)，下班前應檢查設備電源是否關閉。

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