1. 菌落總數(shù)檢驗(yàn)
2. 結(jié)果計(jì)數(shù)
•可用肉眼觀察,必要時(shí)用放大鏡或菌落計(jì)數(shù)器,記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。菌落計(jì)數(shù)以菌落形成單位(colony-formingunits,CFU)表示。
•選取菌落數(shù)在30CFU~300CFU之間、無(wú)蔓延菌落生長(zhǎng)的平板計(jì)數(shù)菌落總數(shù)。低于30CFU的平板記錄具體菌落數(shù),大于300CFU的可記錄為多不可計(jì)。每個(gè)稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù)。
•其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí),則不宜采用,而應(yīng)以無(wú)片狀菌落生長(zhǎng)的平板作為該稀釋度的菌落數(shù);若片狀菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均勻,即可計(jì)算半個(gè)平板后乘以2,代表一個(gè)平板菌落數(shù)。
•當(dāng)平板上出現(xiàn)菌落間無(wú)明顯界線的鏈狀生長(zhǎng)勢(shì),則將每條單鏈作為一個(gè)菌落計(jì)數(shù)。
3. 結(jié)果計(jì)算
•若只有一個(gè)稀釋度平板上的菌落數(shù)在30~300CFU之間,計(jì)算兩個(gè)平板菌落數(shù)的平均值,再將平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù),作為每g(mL)樣品中菌落總數(shù)結(jié)果。
•若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)均大于300CFU,則對(duì)稀釋度最高的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),其他平板可記錄為多不可計(jì),結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計(jì)算。
•若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均小于30CFU,則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。
•若所有稀釋度(包括液體樣品原液)平板均無(wú)菌落生長(zhǎng),則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)計(jì)算。
•若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均不在30CFU~300CFU之間,其中一部分小于30CFU或大于300CFU時(shí),則以最接近30CFU或300CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。
•若有兩個(gè)連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時(shí),按式(1)計(jì)算:
4. 結(jié)果報(bào)告
•菌落數(shù)小于100CFU時(shí),按“四舍五入”原則修約,以整數(shù)報(bào)告。
•菌落數(shù)大于或等于100CFU時(shí),第3位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后,取前2位數(shù)字,后面用0代替位數(shù);也可用10的指數(shù)形式來(lái)表示,按“四舍五入”原則修約后,采用兩位有效數(shù)字。
•若所有平板上為蔓延菌落而無(wú)法計(jì)數(shù),則報(bào)告菌落蔓延。
•若空白對(duì)照上有菌落生長(zhǎng),則此次檢測(cè)結(jié)果無(wú)效。
•稱重取樣以CFU/g為單位報(bào)告,體積取樣以•CFU/mL為單位報(bào)告。
•注:菌落總數(shù)結(jié)果計(jì)算與報(bào)告方式實(shí)例見(jiàn)以下表格
編號(hào) |
稀釋倍數(shù)及菌落數(shù) |
|||||||
10-1 |
10-2 |
10-3 |
菌落總數(shù) |
報(bào)告方式 |
||||
平皿1 |
平皿2 |
平皿1 |
平皿2 |
平皿1 |
平皿2 |
(CFU/g或ml) |
(CFU/g或ml) |
|
1 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
﹤1×10 |
﹤10 |
2 |
24 |
26 |
5 |
7 |
0 |
0 |
250 |
250或2.5×102 |
3 |
多不可計(jì) |
多不可計(jì) |
150 |
160 |
15 |
20 |
15500 |
16000或1.6×104 |
4 |
多不可計(jì) |
多不可計(jì) |
236 |
245 |
35 |
33 |
24955 |
25000或2.5×104 |
5 |
多不可計(jì) |
多不可計(jì) |
236 |
245 |
25 |
33 |
24476 |
24000或2.4×104 |
6 |
多不可計(jì) |
多不可計(jì) |
多不可計(jì) |
多不可計(jì) |
320 |
330 |
325000 |
330000或3.3×105 |
7 |
多不可計(jì) |
多不可計(jì) |
310 |
320 |
28 |
26 |
27000 |
27000或2.7×104 |
8 |
多不可計(jì) |
多不可計(jì) |
295 |
325 |
22 |
20 |
29500 |
30000或3.0×104 |
9 |
菌落蔓延 |
菌落蔓延 |
菌落蔓延 |
菌落蔓延 |
菌落蔓延 |
菌落蔓延 |
菌落蔓延 |
菌落蔓延 |
1質(zhì)量控制
•實(shí)驗(yàn)室過(guò)程中,每批樣品稀釋液都要做空白對(duì)照。
•為了控制環(huán)境污染,每次檢驗(yàn)過(guò)程中,于檢驗(yàn)臺(tái)上打開(kāi)兩塊計(jì)數(shù)瓊脂平板,并在檢驗(yàn)環(huán)境中暴露不少于15分鐘,將此平板與本批次樣品同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng),以掌握檢驗(yàn)過(guò)程中是否存在來(lái)自檢驗(yàn)環(huán)境的污染。