Part 2 無(wú)菌藥品放行關(guān)注的具體要點(diǎn)

（1）原輔料。原輔料的質(zhì)量必須經(jīng)過(guò)評(píng)估，確認(rèn)其來(lái)自經(jīng)批準(zhǔn)的供應(yīng)商（符合藥典標(biāo)準(zhǔn)），且該原料已由本企業(yè)正確接收、取樣并進(jìn)行檢測(cè)合格，符合供應(yīng)商與制造商確定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。在無(wú)菌保證方面，應(yīng)當(dāng)涵蓋微生物限度檢查。經(jīng)檢測(cè)合格的原輔料才可用于產(chǎn)品生產(chǎn)。

原輔料一般包括接收、儲(chǔ)存、使用等環(huán)節(jié)，放行過(guò)程應(yīng)對(duì)每個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行關(guān)注，重點(diǎn)關(guān)注：每批原材料、中間體或包裝材料的名稱(chēng)和數(shù)量；供應(yīng)商名稱(chēng)以及有關(guān)資質(zhì)文件；供應(yīng)商的控制編號(hào)或其他識(shí)別編號(hào)；物料的內(nèi)部編號(hào)；接收日期；物料使用的記錄；通QC對(duì)原輔料檢查情況；材料符合既定規(guī)格的檢查和評(píng)審的文件；不合格原材料、中間體或包裝材料的處理方式等。

（2）過(guò)程產(chǎn)品控制。無(wú)菌藥品生產(chǎn)的一個(gè)重要特點(diǎn)是在生產(chǎn)過(guò)程的不同階段對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行微生物監(jiān)測(cè)。雖然這種監(jiān)測(cè)可能與無(wú)菌或非無(wú)菌的概率沒(méi)有直接關(guān)系，但這種監(jiān)測(cè)是一種很好的指標(biāo)，可以判斷是否有什么地方出了問(wèn)題或可能出問(wèn)題。在這里，應(yīng)該為從原材料開(kāi)始合成到最終滅菌之間的每個(gè)處理階段建立和證明時(shí)間限制。

監(jiān)測(cè)內(nèi)容應(yīng)包括：進(jìn)料藥品成分和包裝成分的微生物限度和細(xì)菌內(nèi)毒素監(jiān)測(cè)；使用總細(xì)菌數(shù)（TVC）技術(shù)進(jìn)行過(guò)程中生物負(fù)荷監(jiān)測(cè)；預(yù)滅菌過(guò)濾生物負(fù)荷監(jiān)測(cè)；消毒劑有效性測(cè)試，包括耐藥菌株檢查。

在批放行方面，有必要確認(rèn)抽樣已經(jīng)按照預(yù)先批準(zhǔn)的抽樣計(jì)劃進(jìn)行，所有的測(cè)試方法都應(yīng)得到驗(yàn)證。對(duì)任何超出限額或超出趨勢(shì)的結(jié)果進(jìn)行評(píng)估，并對(duì)該批產(chǎn)品的影響進(jìn)行評(píng)估。

此外，記錄應(yīng)詳細(xì)說(shuō)明：材料被按正確的順序使用；物料被混合和攪拌所需的時(shí)間長(zhǎng)度；設(shè)備或產(chǎn)品的清潔保持時(shí)間，以確保它們?cè)谟行�時(shí)間內(nèi)使用。

以下也應(yīng)作為中間生產(chǎn)的一部分進(jìn)行評(píng)估：中間體的名稱(chēng)、批號(hào)或代碼；完整的原材料和中間體清單；每種原料或中間體的準(zhǔn)確數(shù)量或比例，包括計(jì)量單位。

另外，在批記錄中應(yīng)詳細(xì)說(shuō)明以下內(nèi)容：要遵循的規(guī)程；使用的工藝參數(shù)范圍；用于關(guān)鍵設(shè)備準(zhǔn)備的方法或參考方法（如清潔、裝配等）；取樣說(shuō)明和過(guò)程控制，必要時(shí)應(yīng)列出可接受標(biāo)準(zhǔn)；完成個(gè)別處理步驟和/或整個(gè)流程的時(shí)間限制；預(yù)期收率范圍等。

（3）環(huán)境監(jiān)測(cè)評(píng)估。環(huán)境監(jiān)測(cè)是評(píng)估制藥設(shè)施內(nèi)環(huán)境質(zhì)量能夠保持有效控制的一個(gè)重要手段。無(wú)菌生產(chǎn)過(guò)程的環(huán)境監(jiān)測(cè)應(yīng)制定方案，并經(jīng)過(guò)批準(zhǔn)。正式方案應(yīng)將浮游菌、沉降菌、懸浮粒子以及工作人員衛(wèi)生情況和設(shè)施設(shè)備打的表面微生物納入監(jiān)測(cè)，取采樣（監(jiān)測(cè)點(diǎn)）位置應(yīng)進(jìn)行評(píng)估，一般選取為可能對(duì)產(chǎn)品生產(chǎn)產(chǎn)生不利的位置。對(duì)于環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)的異常，必須進(jìn)行偏差調(diào)查，確定根本原因，并采取相應(yīng)的糾正和預(yù)防措施。特別是當(dāng)A級(jí)區(qū)域超標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，需要進(jìn)行詳細(xì)的評(píng)估，以確定該批是否適合放行。放行審核前應(yīng)確認(rèn)確信環(huán)境監(jiān)測(cè)已按照方案計(jì)劃進(jìn)行。

環(huán)境監(jiān)測(cè)一般選用以下方式進(jìn)行取采樣：

①被動(dòng)空氣取樣：沉降碟；

②主動(dòng)空氣采樣：容積式空氣采樣器；

③表面樣品：接觸（RODAC）碟；

④表面樣品：拭子；

⑥指盤(pán)（從事灌裝工作的人員需要）；

⑦衣袖/罩衣板（參與填充活動(dòng)的工作人員所需）；

⑧粒子計(jì)數(shù)。

環(huán)境監(jiān)測(cè)應(yīng)貫穿于整個(gè)無(wú)菌灌裝全過(guò)程。批次相關(guān)的監(jiān)控不僅包括灌裝期，還包括以下幾個(gè)階段：準(zhǔn)備階段；灌裝階段、灌裝后灌裝機(jī)關(guān)鍵表面監(jiān)測(cè)（包括灌裝泵、灌裝針等與藥液接觸的位置）。

（4）制藥用水的生物負(fù)荷和內(nèi)毒素控制。制藥用水作為一般無(wú)菌藥品特別是注射劑使用量最大的物質(zhì)，應(yīng)當(dāng)采用合適制備、儲(chǔ)存和分配方法以確保在使用時(shí)內(nèi)毒素始終處于符合規(guī)定的水平。循環(huán)系統(tǒng)和用戶(hù)使用點(diǎn)需要定期監(jiān)測(cè)內(nèi)毒素和微生物負(fù)荷。比如，F(xiàn)DA規(guī)定內(nèi)毒素濃度為＜0.25EU/mL，微生物負(fù)荷濃度為不超過(guò)10CFU/100mL（以R2A瓊脂為培養(yǎng)基，采用膜過(guò)濾法），并不得檢出耐熱菌。

圍繞水系統(tǒng)的各項(xiàng)控制措施應(yīng)該到位。如果出現(xiàn)了任何控制故障，應(yīng)盡快評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)。通常水系統(tǒng)記錄不納入批生產(chǎn)記錄中，但批記錄審查過(guò)程應(yīng)充分了解生產(chǎn)過(guò)程中水系統(tǒng)出現(xiàn)的任何偏差，并評(píng)估偏差對(duì)生產(chǎn)過(guò)程與產(chǎn)品質(zhì)量的影響，尤其是與內(nèi)毒素污染風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)的影響。

（5）質(zhì)量控制（QC）檢驗(yàn)。應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品種類(lèi)與性質(zhì)及有關(guān)規(guī)定要求，確定QC檢驗(yàn)的具體項(xiàng)目與方法，并建立該品種產(chǎn)品的檢驗(yàn)記錄。檢驗(yàn)記錄應(yīng)當(dāng)包括以下內(nèi)容：

①為確保符合既定規(guī)范和標(biāo)準(zhǔn)而進(jìn)行的所有檢測(cè)的完整數(shù)據(jù)；

②應(yīng)對(duì)收到的用于檢測(cè)的樣品進(jìn)行描述，包括物料名稱(chēng)或來(lái)源、批號(hào)以及制造商和/或供應(yīng)商；

③測(cè)試方法的參考依據(jù)；

④對(duì)每種測(cè)試中所使用的樣品重量或尺寸的說(shuō)明，如該方法所描述的；

⑤必須提供全部參考標(biāo)準(zhǔn)品、試劑和標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備和測(cè)試數(shù)據(jù)；

⑥應(yīng)完整存檔檢驗(yàn)過(guò)程產(chǎn)生的所有完整的原始記錄；

⑦與測(cè)試有關(guān)的所有計(jì)算的記錄，如測(cè)量單位、換算系數(shù)和等效系數(shù)；

⑧測(cè)試結(jié)果的聲明，以及它們?nèi)绾闻c既定的驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較；

⑨需要提供對(duì)已建立的分析方法進(jìn)行任何修改的理由；

⑩OOS調(diào)查。

（6）滅菌和去熱原控制。無(wú)菌生產(chǎn)過(guò)程的不同階段均需考慮滅菌或去熱原。部分操作是在生產(chǎn)過(guò)程中進(jìn)行，部分為直接購(gòu)入的無(wú)菌原輔包材。對(duì)于無(wú)菌原輔包材料，必須對(duì)供應(yīng)商提供的檢驗(yàn)合格證明進(jìn)行評(píng)估，以確定滅菌有效性。此外，藥品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)通過(guò)對(duì)供應(yīng)商審計(jì)的方式，對(duì)供應(yīng)商所承擔(dān)的無(wú)菌產(chǎn)品制造與滅菌效果進(jìn)行監(jiān)督與評(píng)估。

對(duì)于生產(chǎn)中進(jìn)行的滅菌和去熱原過(guò)程，批放行過(guò)程必須包括對(duì)所有控制參數(shù)的評(píng)估。這些過(guò)程涉及到容器、小瓶、瓶塞等。對(duì)于最終滅菌的產(chǎn)品，滅菌是對(duì)成品進(jìn)行的。重要的是，滅菌記錄應(yīng)用于每次滅菌運(yùn)行，并應(yīng)作為批放行程序的一部分予以批準(zhǔn)。

在去熱原作用下，這一過(guò)程是滅活內(nèi)毒素所必需的。使用玻璃器皿進(jìn)行無(wú)菌灌裝的產(chǎn)品，使用干熱隧道烘箱去熱原是過(guò)程的關(guān)鍵部分。FDA內(nèi)毒素失活（去熱原）過(guò)程驗(yàn)證的監(jiān)管標(biāo)準(zhǔn)是，通過(guò)內(nèi)毒素挑戰(zhàn)試驗(yàn)，即去熱原烘箱的溫度和設(shè)備在烘箱內(nèi)停留時(shí)間必須在控制參數(shù)之內(nèi)（一般應(yīng)大于250℃，30min），能夠?qū)⒏邉┝績(jī)?nèi)毒素（＞10,000EU/裝置）容器，降低3個(gè)log10。USP新發(fā)布的《干熱去熱原（DRY HEAT DEPYROGENATION）》對(duì)去熱原標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了重新修訂，即處理后的樣品內(nèi)毒素不大于0.1EU^[3]。

采用濕熱滅菌，與高壓滅菌器操作相關(guān)的最基本的要求是確保在滅菌前將滅菌器內(nèi)空氣去除，因?yàn)闊峥諝馐菍?shí)現(xiàn)無(wú)菌的非常差的介質(zhì)。因此，在多孔負(fù)荷的高壓滅菌器中滅菌失敗幾乎都是由于空氣被困在負(fù)荷中。另一個(gè)需要評(píng)估的領(lǐng)域是確保負(fù)載是干的；由于蒸汽質(zhì)量的問(wèn)題而產(chǎn)生的濕負(fù)載是非無(wú)菌的標(biāo)志。

此外，已有較多企業(yè)在滿(mǎn)足相容性的前提下大量使用無(wú)菌的一次性塑料設(shè)備來(lái)降低滅菌過(guò)程引發(fā)的各類(lèi)風(fēng)險(xiǎn)。

（7）無(wú)菌過(guò)濾。與通過(guò)高溫使微生物滅活的過(guò)程不同，過(guò)濾是一種通過(guò)“去除”的方式降低微生物負(fù)荷的方法。過(guò)濾通常在無(wú)菌產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程的不同階段進(jìn)行。對(duì)于無(wú)菌灌裝的產(chǎn)品，半成品在進(jìn)行灌裝前，最后一個(gè)步驟通常采用過(guò)濾除菌的方法。過(guò)濾方法已廣泛應(yīng)用于無(wú)菌液體制劑的生產(chǎn)和氣體的無(wú)菌處理中。

過(guò)濾的一個(gè)重要前提是對(duì)濾膜、濾芯等進(jìn)行孔隙和完整性測(cè)試。目前常用的無(wú)菌濾芯孔徑為0.22μm^[2]，完整性測(cè)試方法主要有起泡點(diǎn)檢測(cè)、前進(jìn)流檢測(cè)以及水侵入檢測(cè)。常見(jiàn)的過(guò)濾器失效的主要原因有：殼體裝配不正確（發(fā)生頻繁高）；有缺陷或有缺陷的濾芯；膜失效（發(fā)生頻率低）；濾器本身存在微生物生長(zhǎng)。

（8）生物凈化。用于無(wú)菌灌裝的隔離器等設(shè)備應(yīng)經(jīng)過(guò)生物凈化處理。最常見(jiàn)的方法是使用過(guò)氧化氫蒸汽。由于過(guò)氧化氫蒸汽沒(méi)有滲透能力，因此歐盟監(jiān)管機(jī)構(gòu)未將其歸類(lèi)為消毒過(guò)程。

汽化過(guò)氧化氫（Vaporized Hydrogen Peroxide，VHP）是常用的隔離技術(shù)。常見(jiàn)的VHP制備方法是將液態(tài)過(guò)氧化氫汽化（在120℃），得到VHP和水蒸氣的混合物。作為一個(gè)“干燥”過(guò)程，VHP的濃度保持在一個(gè)給定的凝結(jié)點(diǎn)以下，這取決于區(qū)域溫度。與其他氣體去污劑相比，過(guò)氧化氫分解為水和氧，安全性較高，凈化過(guò)程無(wú)殘留。

選擇VHP方法必須考慮被凈化設(shè)備的物理性能，一般要求相對(duì)光滑，不透水，并且形狀允許所有表面暴露在蒸汽中。評(píng)估的關(guān)鍵參數(shù)包括過(guò)氧化氫蒸汽的濃度、濕度、溫度和蒸汽停留時(shí)間。

（9）偏差。一般來(lái)說(shuō)，生產(chǎn)過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格按照批準(zhǔn)的流程操作，盡可能避免偏離工藝規(guī)程或者SOP的情況出現(xiàn)。任何偏離原有生產(chǎn)工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、操作規(guī)程等情況應(yīng)進(jìn)行如實(shí)記錄，并開(kāi)展詳細(xì)調(diào)查，評(píng)估偏差對(duì)生產(chǎn)產(chǎn)品質(zhì)量的影響，同時(shí)，要進(jìn)行詳盡調(diào)查，找出發(fā)生偏差的根本原因，并采取適當(dāng)?shù)募m正和預(yù)防措施，避免此類(lèi)情況的再次發(fā)生。

（10）其他方面。除以上重點(diǎn)關(guān)注情況外，需要考慮影響灌裝過(guò)程的其他因素，特別是那些可能影響無(wú)菌保證評(píng)估的方面，如停機(jī)記錄、生產(chǎn)線(xiàn)清洗記錄、設(shè)備和房間清潔記錄以及設(shè)備校準(zhǔn)狀態(tài)、任何影響生產(chǎn)過(guò)程的變更等。