1、能力驗(yàn)證

按照預(yù)先制訂的準(zhǔn)則，通過(guò)實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)，來(lái)評(píng)價(jià)參加者的能力。當(dāng)有的量值的溯源尚難實(shí)現(xiàn)或無(wú)法實(shí)現(xiàn)時(shí)，可利用能力驗(yàn)證來(lái)表明測(cè)量結(jié)果的可信性。

2、實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證

實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證是利用實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)來(lái)判定實(shí)驗(yàn)室的能力的活動(dòng)，也是認(rèn)可機(jī)構(gòu)加入和維持國(guó)際相互承認(rèn)協(xié)議（MRA）的必要條件之一。

二、能力驗(yàn)證樣品接收及準(zhǔn)備

1、操作前仔細(xì)閱讀參指導(dǎo)書，關(guān)鍵是小的備注要注意，很多特殊情況的處理大都在備注里。

2、樣品接收前的檢查很重要，首先對(duì)樣品的完整性進(jìn)行檢查，對(duì)信息的閱讀要全面，如果發(fā)現(xiàn)樣品有問(wèn)題及時(shí)溝通，這樣要比做樣品的時(shí)候在發(fā)現(xiàn)來(lái)的要及時(shí)，能節(jié)省不少的時(shí)間；

3、作業(yè)指導(dǎo)書的閱讀要到位，很多能力驗(yàn)證樣品寄到后要跟一份作業(yè)指導(dǎo)書，作業(yè)指導(dǎo)書中往往會(huì)對(duì)本次能力驗(yàn)證的樣品、成分、尺寸、選擇方法、樣品的結(jié)果記錄、包括修約或樣品的粘貼、樣品寄發(fā)的注意事項(xiàng)等有明確的規(guī)定，熟讀這些對(duì)試驗(yàn)準(zhǔn)備有很好的作用。比如有的會(huì)要求將試驗(yàn)后樣品一塊寄發(fā)組織單位，有的實(shí)驗(yàn)室如果不仔細(xì)閱讀的話很容易將測(cè)試后樣品立即處理掉，如果寄樣時(shí)在看見可就完了。

4、測(cè)試前的準(zhǔn)備工作一定要做好，包括設(shè)備的校準(zhǔn)、試運(yùn)行等，有條件的情況下可以在正式測(cè)試前選擇一塊相仿的樣品進(jìn)行一下預(yù)測(cè)試，這樣會(huì)將測(cè)試過(guò)程中的問(wèn)題提前發(fā)現(xiàn)提前解決。對(duì)正式測(cè)試的操作有幫助。

三、能力驗(yàn)證樣品預(yù)處理

1、培養(yǎng)基配制充分混勻后再滅菌。

正確做法是用一部分水?dāng)嚢杈鶆蚝螅�再加入剩余水量，混勻后滅菌或分裝。

2、混菌法倒皿要充分混勻。

培養(yǎng)基倒完要左5圈右5圈（混勻速度一定要慢，目的是——避免培養(yǎng)基波動(dòng)到二皿接觸的縫隙部分造成后續(xù)污染），找較水平位置冷卻凝固。

3、培養(yǎng)基要不要覆蓋問(wèn)題。

覆蓋的目的是為了阻止活菌在培養(yǎng)基表層通過(guò)鞭毛移動(dòng)，造成片狀生長(zhǎng)，無(wú)法計(jì)數(shù)這一不利現(xiàn)象的發(fā)生。這里可以發(fā)揮主觀能動(dòng)性-對(duì)于不運(yùn)動(dòng)的菌，可以不覆蓋，對(duì)于運(yùn)動(dòng)的菌覆蓋。

總結(jié)一下：

a長(zhǎng)期檢測(cè)同一種樣品，不覆蓋并無(wú)蔓延現(xiàn)象，不覆蓋；長(zhǎng)期檢測(cè)蔓延選擇了覆蓋，一直覆蓋。

b未知樣品，進(jìn)行覆蓋和不覆蓋的比對(duì)實(shí)驗(yàn)，然后決定以后同樣的樣品是否需要覆蓋。養(yǎng)成經(jīng)驗(yàn)。

c能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，覆蓋和不覆蓋的都做，不要吝惜那么一點(diǎn)點(diǎn)培養(yǎng)基或耗材，畢竟能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)做的漂亮才是實(shí)驗(yàn)室（是室而不是人！）能力的綜合體現(xiàn)。

4、培養(yǎng)過(guò)程防止平皿干燥。

培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)基可以倒的適當(dāng)厚一些，比如25mL。培養(yǎng)箱底部接一個(gè)不銹鋼盆，裝上足量無(wú)菌水。

5、 實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)過(guò)程勤觀察。

微生物培養(yǎng)過(guò)程一般需要幾小時(shí)到幾十小時(shí)，要利用這段時(shí)間觀察培養(yǎng)箱及菌生長(zhǎng)情況，比如溫度是否穩(wěn)定，培養(yǎng)室內(nèi)濕度如何等等，多思多看，準(zhǔn)備預(yù)案。方有可能得到與盲樣一致的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

原始記錄應(yīng)有條理、思路清晰,完整準(zhǔn)確地記錄菌株鑒定檢驗(yàn)的全過(guò)程,原始記錄要包含時(shí)間、試驗(yàn)現(xiàn)象、試驗(yàn)結(jié)果三個(gè)要素，方便試驗(yàn)出現(xiàn)問(wèn)題的查找。

四、實(shí)驗(yàn)過(guò)程一定要做陰陽(yáng)對(duì)照

陽(yáng)性對(duì)照，是在試驗(yàn)中，檢驗(yàn)培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件是否適合，如果在實(shí)驗(yàn)中，陽(yáng)性實(shí)驗(yàn)沒(méi)有生長(zhǎng)的話，那這個(gè)實(shí)驗(yàn)是失敗的。陰性對(duì)照主要是檢測(cè)培養(yǎng)基是否污染，在沒(méi)有加入任何東西培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基培養(yǎng)后還是會(huì)顯示陽(yáng)性結(jié)果，這就說(shuō)明培養(yǎng)基滅菌不徹底，染菌了，這樣也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的。

五、培養(yǎng)基方面需要注意的地方

1、培養(yǎng)基配制充分混勻后再滅菌。

正確做法是用一部分水?dāng)嚢杈鶆蚝螅�再加入剩余水量，混勻后滅菌或分裝。

一定要用震蕩器充分混勻水化液，作為檢測(cè)原液，普通手搖混勻與經(jīng)震蕩器混勻的樣品液，計(jì)數(shù)結(jié)果相差較大�；靹蚝蟮臉悠穱�(yán)格按照指導(dǎo)書規(guī)定的時(shí)間進(jìn)行檢驗(yàn)。

2、混菌法倒皿要充分混勻。

培養(yǎng)基倒完要左5圈右5圈（混勻速度一定要慢，目的是——避免培養(yǎng)基波動(dòng)到二皿接觸的縫隙部分造成后續(xù)污染），找較水平位置冷卻凝固。

3、培養(yǎng)基要不要覆蓋問(wèn)題。

覆蓋的目的是為了阻止活菌在培養(yǎng)基表層通過(guò)鞭毛移動(dòng)，造成片狀生長(zhǎng)，無(wú)法計(jì)數(shù)這一不利現(xiàn)象的發(fā)生。這里可以發(fā)揮主觀能動(dòng)性-對(duì)于不運(yùn)動(dòng)的菌，可以不覆蓋，對(duì)于運(yùn)動(dòng)的菌覆蓋。

總結(jié)一下：

a 長(zhǎng)期檢測(cè)同一種樣品，不覆蓋并無(wú)蔓延現(xiàn)象，不覆蓋；長(zhǎng)期檢測(cè)蔓延選擇了覆蓋，一直覆蓋。

b 未知樣品，進(jìn)行覆蓋和不覆蓋的比對(duì)實(shí)驗(yàn)，然后決定以后同樣的樣品是否需要覆蓋。養(yǎng)成經(jīng)驗(yàn)。

c 能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，覆蓋和不覆蓋的都做，不要吝惜那么一點(diǎn)點(diǎn)培養(yǎng)基或耗材，畢竟能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)做的漂亮才是實(shí)驗(yàn)室（是室而不是人！）能力的綜合體現(xiàn)。

4、 實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)過(guò)程勤觀察。

微生物培養(yǎng)過(guò)程一般需要幾小時(shí)到幾十小時(shí)，要利用這段時(shí)間觀察培養(yǎng)箱及菌生長(zhǎng)情況，比如溫度是否穩(wěn)定，培養(yǎng)室內(nèi)濕度如何等等，多思多看，準(zhǔn)備預(yù)案。方有可能得到與盲樣一致的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

原始記錄應(yīng)有條理、思路清晰,完整準(zhǔn)確地記錄菌株鑒定檢驗(yàn)的全過(guò)程,原始記錄要包含檢測(cè)時(shí)間、檢測(cè)現(xiàn)象、檢測(cè)結(jié)果三個(gè)要素，方便檢測(cè)出現(xiàn)問(wèn)題的溯源。

六、結(jié)果判定

結(jié)果的判定一般根據(jù)設(shè)備操作，但是對(duì)于人為操作如評(píng)級(jí)、手工操作等結(jié)果可能會(huì)因?yàn)槿藛T的差別而會(huì)有不同的偏差，這樣在判定時(shí)最好是找有經(jīng)驗(yàn)的部門負(fù)責(zé)人或質(zhì)量專家一塊定奪，這樣的話會(huì)減少很多不必要的錯(cuò)誤。